西安地区健康体检女性HPV感染状况及基因型别分析
时间：2023-01-24 09:50:04 来源：天一资源网 本文已影响 人 
吴晓康，张 妮，尹佳锋，刘海龙，靳 莉，吴晓玲，李妙羡，耿 燕
（西安交通大学第二附属医院a.检验科；
b.妇产科，西安710004）
人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）属乳头瘤病毒科，是一种无被膜的双链环状 DNA病毒，感染人体可导致皮肤黏膜的鳞状上皮细胞周期调节的紊乱及增殖的失控[1-2]。随着检测技术的发展，新的HPV 亚型不断被发现，在不同国家区域、不同种族人群，其HPV 感染的型别有所差异，所致疾病也不尽相同。依据其致病力强弱分为高危型和低危型，高危型常与女性宫颈癌、阴道癌、宫颈上皮内瘤变的发生密切相关，而低危型常引起生殖器疣等病变[3-5]。HPV 感染及所引发的疾病已然成为共同关注的公共健康问题。
宫颈癌已成为危害女性健康常见的恶性肿瘤之一，近年来其发病率呈现上升和年轻化趋势[3]，而宫颈癌的发生与高危型的HPV感染密切相关。因此，及时了解本地区HPV 感染情况对其防治工作具有重要意义。本文分析2019 ～2021年来院就诊的体检人群HPV 检测及基因分型结果，以了解本地区女性HPV 感染状况和流行特征。
1.1 研究对象 选取2019年4月～2021年12月在西安交通大学第二附属医院体检的10 772 例女性HPV 受检者为研究对象，年龄20 ～85 岁，标本类型为宫颈脱落细胞，同一受检者仅收集第一次检测结果。纳入标准：①检查前3 天内无阴道放药、冲洗等治疗，就诊前24h 内无同房；
②宫颈完整，既往有性生活史者。排除标准：①妇科恶性肿瘤、有宫颈手术史者；
②妊娠期、月经期女性。所有受检者均知情，自愿参与检查。
1.2 试剂与仪器 TC-412 扩增仪(英国Techne 公司)，LBP-3124 自动核酸分子杂交仪(广州安必平医药科技股份有限公司)，HPV 核酸检测及分型试剂盒（广州和实生物技术有限公司），HPV 阴、阳性质控品均为试剂盒包含。
1.3 方法
1.3.1 宫颈脱落细胞采集与保存：采用专用宫颈刷紧贴宫颈口，单向旋转4 ～5 周后取出，放入装有生理盐水（2ml）的无菌样本管中送检。若样本黏液过多或含血量过多应该重新取样。对未能及时检测的标本，放置4℃冰箱保存并次日检测。
1.3.2 检测：采用PCR-反向点杂交法检测获取的样本，分析其28 种HPV 基因型。样本核酸提取、PCR 扩增、产物杂交及显色等步骤，按照说明书操作。
1.3.3 结果比较分析：对本研究结果的感染率、HPV 基因型别、高发年龄段等与省内及国内其他地区报道比较分析。
1.4 统计学分析 采用SPSS22.0 统计软件对数据进行分析，计数资料比较采用χ2检验，当P＜0.05为差异具有统计学意义。
2.1 HPV 感染率及各年龄段分布情况 见表1。在接受HPV 检测的10 772 例女性人群中，共检出HPV 阳性者952 例，感染率为8.84%；
将受检人群分为＜25 岁、25 ～＜34 岁、34 ～＜44 岁、44 ～＜ 54 岁、54 ～＜64 岁、≥64 岁六个年龄组。其中＜25 岁女性HPV 感染率最高（14.29%），其次是54 ～＜64 岁和≥64 岁年龄组女性（11.71%和11.48%）；
各年龄组HPV 感染均以HPV 高危型别为主。除＜25 岁年龄组外，其他五个年龄组在高危型别感染例次（双重感染者记为感染2 例次，依次类推）上与中危型、低危型别感染例次上的差异有统计学意义（均P＜0.05）。
表1 各年龄组HPV 感染率及分布情况
2.2 HPV 感染基因型别情况 本研究中共检测出27 种 HPV 基因型，952 例阳性者共感染1 188 例次。按感染例次排列，位于前四位的基因型依次为HPV52，HPV53，HPV16 和HPV42，占比依次为14.98%（178 /1 188），10.19%（121 /1 188），8.59%（102/1 188）和7.32%（87/1 188）。
单一型别感染769 例，感染率为7.14%（769/10 772），占比80.78%（769/952）。单一型别感染以HPV 高危型别感染为主，占比55.01%（423/769），感染例数由高到低依次为HPV-52，HPV-16，HPV-56；
中危型别占比15.73%（121/769），以HPV-53，HPV-66 型为主；
低危型别占比29.26%（225/769），以HPV-42，HPV-61 型为主。
混合型感染183 例，感染率为1.70%（183/10 772），占比19.22%，包括了双重、三重、四重、五重、七重感染病例，其中以双重型别和三重型别感染为主，占比分别为79.23%（145/183）和15.85%（29/183）。常见的双重感染组合类型为：HPV52+58 型（占比4.83%），HPV42+52 型（占比3.45%），HPV52+81 型（占比3.45%），HPV52+53 型（占比2.76%），HPV53+56 型（占比2.76%），混合感染各型别组合模式各异。
2.3 本研究结果与其他地区报道结果比较 见表2。将本研究结果与省内及国内一些地区报道的情况比较，结果发现国内女性HPV感染均以单一感染、高危基因型为主，但在HPV 感染率、常见基因型及高发年龄段上结果有所不同。
表2 本研究与其他研究结果比较
宫颈细胞学检查是宫颈上皮内瘤变及宫颈癌筛查普遍应用的方法，但存在其局限性。高危型HPV检测用于宫颈癌筛查和宫颈细胞学检查异常的患者，可有效的增加宫颈病变检出率，提高细胞学检查敏感度[13-14]。
本次研究纳入10 722 例女性健康体检人群，其结果HPV 感染率（8.84%）低于省内、外地区报道的结果，分析其原因：①可能是研究对象有所不同。有研究表明几乎全部的宫颈癌患者病理标本中均发现有高危型HPV，而本研究纳入的是健康体检人群，其HPV 感染风险低于门诊或住院的疑似患者；
②近年来，HPV 多价疫苗在社会积极推广，随着女性人群接种率的提高，本地区HPV 感染有下降的趋势[15]；
③各地区经济发展水平不均衡、生活习惯差异等因素导致HPV 感染状况呈现地区差异性。
在HPV 感染高发年龄段的分布上，本研究结果为＜25 岁和＞54 岁两个年龄段，这个结果与龚娅等[10,12,16]研究结果普遍一致，这表明国内HPV 感染高发在年龄段的“两端”人群。究其原因，年轻女性高发可能与社会交往多、性知识缺乏，自我保护意识薄弱，增加其HPV 感染的风险。虽然年轻人免疫力强，HPV 感染常为轻症，但是持续性、反复感染就会转变成宫颈癌发生的重要风险因素；
而绝经期女性高发，多与激素水平降低、卵巢功能减退、阴道微生态屏障功能减弱密切相关。更需要关注的是各年龄组均以HPV 高危型别感染为主，因而在加强年轻女性和中老年女性HPV筛查的同时，对HPV 高危型别的检测，在积极预防宫颈癌发生中具有重要意义。
本次研究共检测出27 种HPV 基因型（高危型HPV-59 未检出），其中高危型以HPV52，16，56 型为主，中危型以HPV53 型为主，低危型以HPV42 为主，前四位依次为HPV52，53，16，42 型。与省内、外地区比较，其HPV 感染均以高危型感染为主（如HPV16，52，58），仅在个别基因型别和占比排列上有所差异，如本研究中高危型HPV58感染例次不高。国内各地区HPV 感染率虽然不同，但是感染均集中在高危型别上，而高危型别是与妇科恶性病变密切相关的危险因素。因此，笔者认为除了关注各地区HPV 感染率情况，更应该重视HPV 高危型别的分布和占比情况。
根据HPV 的感染状态不同分为单一感染和混合感染[17]。本次研究结果以单一型感染为多，这与国内报道的结果一致，提示当前我国女性人群HPV感染以单一型、高危型别为特征。这为HPV 感染筛查及宫颈癌的防治策略提供依据，如HPV 筛查以高危型别检测为主，可以缩短检测时间、减轻患者费用；
在接种HPV 多价疫苗时，优先考虑使用针对高危型别的疫苗。目前上市的HPV 疫苗有2价（HPV16，18 型）、4 价（HPV6，11，16，18 型）、9 价（HPV6，11，16，18，31，33，45，52，58 型），若能接种9 价疫苗可更好起到广泛预防作用，然而其价格昂贵，难以普遍推广[10]。因而，研制适宜中国人群HPV 感染型别的多价疫苗，对降低感染、预防宫颈癌发生具有重要意义。此外，HPV 型别混合感染病例现在已经普遍存在，本次研究除双重、三重感染占多数外，还可以见到四重、五重和七重型别感染的病例，提示针对多重感染时，要提高检测方法的敏感度和特异度，保证检测质量以免出现假阳性或假阴性结果，同时更要关注混合型感染对于治疗及预后的影响。
综上所述，本研究分析了西安地区HPV 感染和基因型别流行情况，旨在为本地卫生部门制定HPV 感染防治工作提供依据。后续将会持续关注本地HPV 感染及基因型别流行特征，扩大样本量、形成多中心分析研究，以获得更加客观准确的结果。
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