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    鸡新城疫病毒

    时间:2020-08-30 08:53:17 来源:天一资源网 本文已影响 天一资源网手机站

     鸡新城疫病毒

     鸡新城疫(ND)是极易传染的毁灭性疾病,被国际动物卫生组织(OIE)列为一类传染病,最常侵袭家鸡和珍珠鸡,也能感染其他家禽和野鸟。水禽和海鸟通常具有较强的抵抗力但可以作为带毒者。人也有易感性,常因接触病禽和病毒而感染。

     本病于1926年首次发现于英国新城,故名。本病死亡率极高,强毒株引起的感染常达100%,广泛分布于世界各地。

     新城疫病毒为单股RNA病毒,属于禽副粘病毒Ⅰ型。

     一、形态特征

      成熟的病毒粒子直径约为100~250nm,有囊膜的病毒粒子呈圆形,但常因囊膜损坏而形态不规则。囊膜上有纤突长约8nm,为脂蛋白,具有血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)活性。病毒粒子的内部有一核心,就是病毒的核衣壳,直径约17nm。

     二、理化特性

     新城疫病毒(NDV)在55℃经45分钟或阳光直射下经30分钟灭活,但在4℃经几周,在-20℃经几个月,在-70℃经几年感染能力不受影响,在鲜鸡蛋中经几个月、在冻鸡中经2年仍有病毒存在,NDV对低温抵抗力较强。

     碳酸钠和氢氧化钠对其消毒效果不理想,大多数除垢剂能将其迅速灭活,煤酚皂、甲酚配成2%-5%浓度可以在5分钟内杀死病毒。0.1%福尔马林37℃时6小时可以杀灭病毒。

     三、生物学活性

     1、血凝性:NDV能凝集人、禽、小鼠等的红细胞,是由于其HN蛋白能结合红细胞表面的受体,这一特性和抗血清的特异性抑制作用可用于本病的诊断。

     2、神经氨酸酶活性:神经氨酸酶(NA)也是HN蛋白的一部分,存在于副粘病毒属的所有成员,此酶的明显作用是可以将病毒逐渐从红细胞上洗脱下来。

     3、细胞融合与溶血:NDV能使感染的细胞融合,造成红细胞溶血。

     四、培养特性

      NDV易在10-12日龄的鸡胚绒毛尿囊膜内或尿囊腔内生长,一般接种后24-72小时可导致鸡胚死亡,鸡胚呈出血性病变和脑炎,感染的尿囊液能凝集红细胞。鹌鹑胚易感性更高,但病毒滴度没有鸡胚高。

     NDV大多数毒株能在许多继代和传代动物细胞内增殖,最常用的是鸡胚成纤维细胞、鸡胚肾细胞、仓鼠肾细胞,但细胞培养物的病毒浓度常比鸡胚低一个滴度。

     五、病原性

     NDV不同毒株对宿主的致病力相差很大,鸡是高度敏感的,鸭和鹅可能被感染,但不表现临床症状。

     NDV对鸡的致病性主要由病毒株决定,但感染剂量、感染途径、鸡的日龄和环境条件也有影响。一般越小发病越急,雏鸡感染野外强毒可能突然死亡,较大的鸡可能病程较长,并有典型的临床症状。自然感染的鸡呼吸道症状较重,而肌肉、脑内和静脉注射感染的鸡神经症状较重。

     NDV复制时,前体蛋白F0需要裂解成F1和F2,才能使子代病毒具有感染性,胰酶能裂解NDV所有毒株的F0,体外处理非感染性的病毒可以使其恢复感染性。

     所有的NDV都可以在鸡胚尿囊腔内增殖,并产生具有感染性的子代病毒。对鸡有致病性的病毒不论是否加入胰酶,可以在体外多种细胞内增殖,但低毒力毒株只有加入胰酶才能复制。

     鸡新城疫自然感染的潜伏期一般为5-7天,病毒毒力强大的可在3天内出现临床症状,毒力弱者可拖延至几周,临床症状变化较大,视爆发程度而异,其他许多因素也能影响临床表现,包括鸡的日龄和免疫状况,感染途径以及有无其他微生物并发感染等。

     在自然条件下,NDV侵入宿主的主要途径是呼吸道和眼结膜,有时也可以通过消化道侵入,病毒先吸附于上皮细胞然后迅速侵入,可在24小时内完成第一轮复制,接着释放新病毒引起病毒血症,并在身体的感染部位进行第二轮增殖,约3天病毒滴度达到最高峰。随后由于干扰素和特异性抗体的产生,病毒增殖受到抑制。强毒株和弱毒株的区别在于前者对上皮细胞的破坏性更强,病毒释放更快,通过血脑屏障更容易。大多NDV病毒株呈嗜神经性,某些呈嗜肺性,偶尔呈嗜肠性。

     六、诊断

     通常根据病史、临床症状和病死鸡的剖检即可做出。但温和型新城疫和多种微生物混合感染较难做出确切诊断,在没有神经性症状的情况下可能与其他呼吸道疾病混淆,特别是鸡群中本来就有其他呼吸道感染时,这时就需要进行病毒分离和血清学诊断。这个过程比较复杂,比较专业的实验室才能做出确切诊断。

     七、疫苗和免疫

     目前大多数国家都采取接种免疫的方法来控制和减少本病的发生,根据具体情况,不同的国家和地区制备和应用不同的弱毒疫苗和灭活疫苗。

     灭活疫苗的优点是病毒被杀死了,没有散播疾病的危险。各种灭活剂包括紫外线、福尔马林、氯仿、β-丙内脂都可以灭活病毒。因此制备疫苗的鸡胚如果混有其他病毒,也不会导致危险。灭活疫苗反应轻微,适合雏鸡、初产母鸡和健康状态较差的鸡,灭活疫苗的免疫期较短,一般不超过6个月。为了增强免疫效果,常在疫苗中加入氢氧化铝和油类佐剂。

     活疫苗有弱毒疫苗和中等毒力疫苗两类。

     1、弱毒疫苗:包括自然弱毒株,包括F株(Ⅲ系)、B1株(Ⅱ系)、Lasota株(Ⅳ系)和V4株,这些毒株一般没有致病力,仅偶尔致发轻微呼吸道症状或其他反应,弱毒株可以用于1日龄和幼龄雏鸡,每只鸡接种106~107EID50(半数鸡胚感染量)。

     2、中等毒力疫苗:最常用的毒株为Mukteswar株(Ⅰ系)、Roakin株、Komorov株、Herts 33株。每只鸡接种计量为105EID50(半数鸡胚感染量),一般采取肌肉注射进行免疫。中等毒力疫苗免疫效果好,注射后能产生坚强的免疫力,免疫保护期可长达一年,可用于紧急免疫,但一般不能用于4周龄一下的雏鸡。Roakin株是在美国分离到的自然流行株,Komorov株是由强毒通过雏鸡脑内连续传代致弱的毒株,Mukteswar株和Herts 33株是中等毒力毒株中最强的毒株,是强毒株通过鸡胚连续传代致弱得到的。所有中等毒力都是用于加强免疫接种用,不能用于初免。许多国家禁止使用中等毒力活疫苗。

     大多数活疫苗是由鸡胚制备的,并经冻干保存。弱毒株如B1株常用于滴鼻和点眼接种,也可以用于气雾免疫和饮水免疫,随后再接种免疫力较强的Lasota株,Lasota株是弱毒疫苗中毒力最强的毒株,因此一般不能用于2周龄一下的雏鸡,易感雏鸡接种后反应较重。如果流行的病毒毒力很强,一般采取先用弱毒疫苗接种,随后再用中等毒力疫苗加强免疫,中等毒力疫苗一般采取肌肉或翅部皮下接种,接种后可能引起轻微的反应,产生的保护力虽然大于灭活疫苗,但不能排除疫苗毒恢复为强毒的危险,即使这种可能性极小,隐性带毒鸡的鸡蛋可能带有NDV,如果应用这种鸡蛋制备疫苗,接种易感雏鸡,往往会造成严重的爆发流行。因此,在没有本病流行的地区不应接种疫苗。

     由于家禽养殖量很大,预防接种花费的人工和时间十分可观,因此常采用联合疫苗进行接种免疫,例如将新城疫与传染性支气管炎、鸡痘等制成二联或多联疫苗。

     NDV能适应于很多哺乳动物细胞,如猪和牛的肾单层细胞,因此可以用于培育弱毒后备注和生产减毒疫苗,但免疫原性较差,必须采取肌肉注射才能奏效。病毒在细胞上增殖的滴度低于鸡胚,因此,目前的活疫苗都采用鸡胚生产。

     由于疫苗接种,母鸡体内常有较高水平的NDV抗体,并能将抗体转移到卵泡中。孵化后,胚胎和雏鸡在发育阶段将卵黄中的免疫球蛋白吸收入体内,从而获得被动免疫。因此这些雏鸡在出壳后5周内,对疫苗的免疫应答极弱,形成的免疫力一般不超过5个月,甚至不到2个月。为了克服这一困难,对于容易遭受新城疫威胁的易感雏鸡应在出壳后几天内接种新城疫弱毒疫苗,1日龄雏鸡接种疫苗效果常不理想,雏鸡日龄越大免疫效果越好。为了获得足够的免疫力,要在4周龄再用弱毒进行第二次免疫,这样可以在3-5个月内提供足够的免疫力。种鸡可以在8-10周龄和16-20周龄,以后每隔5个月用灭活疫苗或中等毒力疫苗接种。接种活疫苗不但有混入NDV野毒的潜在风险,而且可以使其他呼吸道疾病发病率增加。

     通过多年的实践,建议工厂化养殖鸡场采用B1株或Lasota株弱毒疫苗,根据各批1日龄雏鸡的母源血凝抑制抗体水平,在监测的基础上确定首免接种日龄,当雏鸡血凝抑制滴度降到1:16时,进行第一次饮水免疫,25天后再做第二次饮水免疫,再经60天进行第三次气雾免疫,此后每隔120天气雾免疫一次。为了安全起见,一周以内的雏鸡做好不用Lasota株弱毒疫苗。

     当免疫鸡接触自然野毒时,可能成为短暂的带毒者,并排出病毒,可以造成易感鸡群疾病爆发。

     现代分子生物学的研究使人们对NDV的致病性和抗原性有了更新的了解,证明了HA和F基因与二者有着紧密的关系。采用基因工程技术已经克隆HA和F基因,并使其在病毒载体内进行表达,如痘苗病毒、鸡痘病毒、鸽痘病毒等,并证明了重组基因疫苗免疫鸡能抵抗强毒的攻击。由此可见,基因工程疫苗或亚单位疫苗已经成为新城疫疫苗的研究方向,开发前景十分广阔。

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